ELISA試劑盒原理和操作步驟并不陌生，不外乎固定抗原，添加一抗、二抗和底物，操作過程中夾雜著洗滌和封閉步驟。然而，即使是平淡無奇的洗滌和封閉，如果操作不合理，也會很大程度上影響實驗的準(zhǔn)確度。實驗結(jié)束時我們是否能獲得有意義而且準(zhǔn)確的信息，這在很大程度上取決于操作結(jié)果的正確與否。
ELISA試劑盒使用方法：
1、血清：操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿：EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液：1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液。
5、保存：如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。ELISA試劑盒如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
在做ELISA試劑盒實驗時洗滌很重要：
洗滌步驟看似很簡單無聊，其實很重要，因為如果未結(jié)合的材料(如非特異結(jié)合的抗體或檢測試劑)殘留在微孔板中，就會增加背景噪音。如有必要，可增加洗滌液中的鹽濃度，這會阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。如果背景過高，懷疑洗滌不夠，可以嘗試增加洗滌次數(shù)。

CTH    胱硫醚γ裂解酶抗體
CFTR    囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié)因子抗體
CKIP-1    酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗體
CD40L    CD40L抗體
Alpha s1 Casein    α-s1酪蛋白抗體
CIDEB    CIDEB抗體
Scavenging Receptor SR-BI    高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗體
COPS7A    信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基7A抗體
Survivin    細胞凋亡抑制因子抗體
Clostridium perfringens type D    D型產(chǎn)氣莢膜梭菌抗體
Calcitonin    降鈣素抗體
C20orf14    20號染色體開放閱讀框14抗體
CTGF    結(jié)締組織生長因子抗體

ELISA試劑盒