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ELISA試劑盒基本概念
點擊次數(shù):775 更新時間:2018-07-13

ELISA試劑盒基本概念
1、免疫:籠統(tǒng)地概括起來,免疫就是人和動物機體防御、排除外來物質(zhì)(異物)進人體內(nèi),同時識別和清除體內(nèi)死亡、變性物質(zhì)和平定體內(nèi)叛亂分子突變細胞,以保護和穩(wěn)定自身的防護機制。
2、抗原:抗原是指那些能夠誘導機體的免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫應答,產(chǎn)生抗體和致敏效應淋巴細胞,并在體內(nèi)外與之特異性結合,發(fā)生免疫反應的物質(zhì)。
3、抗體:是能與相應的抗原專一性結合的蛋白質(zhì)分子,和機體其他生物大分子一樣是細胞的產(chǎn)物,分泌到體液中或表現(xiàn)在細胞表面上。
4、抗原、抗體反應:抗原和抗體在體外的反應亦稱血清學反應。這類反應可借助免疫學方法進行檢測。
檢測方法及其原理
定量分析抗體的常用方法有擴散法、酶聯(lián)免疫吸附法和火箭免疫電泳法等。
1、免疫擴散法
a、單向免疫擴散法
原理:將待檢抗原滴加于含相應抗體的瓊脂板小孔中,經(jīng)一定時間擴散后。形成乳白色的沉淀壞,在一定濃度范圍內(nèi),抗原的含量與沉淀壞直徑成正比??梢韵扔眉褐煌瑵舛鹊臉藴士乖瞥蓸藴是€,再根據(jù)測試樣品沉淀環(huán)直徑的大小,從標準曲線上查出樣品中抗原的相應含量。
b、雙向免疫擴散法
原理:可溶性抗原與已知可溶性抗體分別加入相鄰的瓊脂糖凝膠板上的小孔內(nèi),在電解質(zhì)存在下讓它們相互向對方擴散。當兩者在zui適當比例處相遇時,即形成一條清晰的沉淀線。根據(jù)稀釋度與已知標準品稀釋度之比,可計算出抗體含量。
2、火箭免疫電泳法
原理:抗原在電場力的作用下向前移動,當抗原在通過含有一定量單一抗體的瓊脂凝膠時,即形成抗原抗體復合物,比例合適即沉淀下來。因抗體遷移率低,而抗原隨電泳向前移動,因而使抗原、抗體形成圓錐形的沉淀峰。在一定濃度范圍內(nèi),峰的高度與抗原的濃度呈正比。
3、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)
原理:ELISA可用于測定抗體,也可用于檢測杭原。其基本原理是采用抗原與抗體的特異反應將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應,用于定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。3種必要的試劑: ①固相的抗原或抗體(免疫吸附劑); ②酶標記的抗原或抗體(標記物); ③酶作用的底物(顯色劑)。
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